1. 研究目的与意义
胰岛素抵抗是2型糖尿病患者的一个典型特征。
胰岛素抵抗是指机体对胰岛素的反应减退，即胰岛素敏感细胞对胰岛素介导的葡萄糖摄取及利用的效率下降，主要表现为外周组织对葡萄糖的摄取减少和胰岛素抑制肝脏葡萄糖输出作用的减弱。
它是2型糖尿病、代谢综合征、脂代谢紊乱、肥胖、动脉粥样硬化等多种病理生理状态的共同基础。
2. 文献综述
胰岛素通过促进肝脏、骨骼肌、脂肪和心脏等胰岛素靶组织摄取和利用葡萄糖从而降低血糖浓度；胰岛素还可以抑制肝、肾和小肠的葡萄糖生成，控制血糖。
胰岛素抵抗是指胰岛素敏感组织失去对胰岛素的敏感性，其降糖作用被削弱，胰岛β细胞代偿性地分泌过量胰岛素。
与1型糖尿病的胰岛素绝对缺乏相较，2型糖尿病通常表现为高血糖和高胰岛素血症，肥胖及其相关的慢性炎症所导致的胰岛素抵抗被认为是2型糖尿病的首要原因[1-2]。
3. 设计方案和技术路线
蛋白质分子的赖氨酸残基的游离ε-氨基可与FITC发生亲核反应，形成硫脲连接而共价结合，形成的偶联物的稳定性很好，该偶联反应在pH9.8条件下进行。
筛选须将靶点蛋白保留于96孔板内才能够检测荧光值，单独纯化并固定糖蛋白操作繁琐复杂，所以我们选用细胞作为底物提供Gal3结合位点（糖蛋白），若存在可与Gal3特异性结合的活性化合物，则其将与Gal3的糖类识别结合结构域结合，使其无法被细胞结合固定，从而游离在溶液中，可被后续过程洗去。
将荧光值的读数和阴性、阳性对照比较，确定化合物对Gal3有无特异性结合的活性。
4. 工作计划
2022.02.25~03.15前期准备工作：查阅文献，拟定实验方案，准备仪器、试剂2022.03.16~04.04学习实验技术：培养细胞，纯化和标记蛋白2022.04.08~04.30对天然产物化合物库进行初步筛选，熟悉和优化筛选模型2022.05.01~05.26对记载有抗炎、改善糖脂代谢作用的中药不同提取部位进行单方筛选，对阳性结果的部位分离提纯后的化合物进行进一步筛选2022.05.27~06.06撰写学术性论文
5. 难点与创新点
1. 通常中药中活性组分的作用靶点难于确定，而且由于其收率较低，限制了进一步的药理学机制研究。
本课题的与其他难以阐明机制的中药活性筛选不同，我们针对组内最新发现的影响胰岛素抵抗的关键分子Gal3进行筛选，有明确的靶点，效率更高，机制更清晰。
2. 该模型为我们课题组自己摸索建立的独特的筛选模型，具有简易高效，结果明显等特点。
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