1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
酚酸类物质与人们的生活密切相关,不仅存在于日常的各种蔬菜、水果中,同时也作为药用成分、护肤成分等进入人们的生活。
酚酸具有众多生物活性抗氧化性、抑菌活性、抗肿瘤活性等,但是在众多活性中,抗氧化活性备受关注,经研究表明:抗氧化性能基本来源于分子中酚羟基的脱氢能力及苯环上邻、对位取代基的影响[1],同时还与酚酸的含量有关。
酚酸的潜在价值主要体现在药用价值和畜牧业生产方面,其价值的利用基于酚酸的各种生物活性。
2. 研究的基本内容和问题
本课题在实验室前人周定勇体外发酵筛选酶解米糠的酶制剂组合的基础上使用筛选出的这4种酶组合(植酸酶 木聚糖酶组合、木聚糖酶 阿魏酸酯酶 植酸酶组合、木聚糖酶 阿魏酸酯酶 植酸酶 纤维素酶组合、木聚糖酶 阿魏酸酯酶 植酸酶 纤维素酶 果胶酶组合)分别添加到35%和65%米糠日粮中饲喂成年公鸡,进一步探索酚酸在单胃动物肠道内的消失情况,为细胞壁的有效降解和酶制剂的合理使用提供理论依据。
本课题主要通过HPLC-DAD检测法以碱醇提取法测定日粮和粪便中酚酸组分含量,以此研究不同酶制剂组合对低水平(日粮中米糠含量为35%)和高水平(日粮中米糠含量为65%)米糠日粮中的酚酸在育成鸡中消化的影响。
实验包括5个处理组,处理Ⅰ为米糠日粮对照组35%或者65%米糠基础饲粮(不添加任何酶),处理Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ在基础饲粮中分别添加(植酸酶 木聚糖酶)组合、(木聚糖酶 阿魏酸酯酶 植酸酶)组合、(木聚糖酶 阿魏酸酯酶 植酸酶 纤维素酶)组合、(木聚糖酶 阿魏酸酯酶 植酸酶 纤维素酶 果胶酶)组合。
3. 研究的方法与方案
1.实验动物与设计选择9日龄的海兰灰蛋鸡640只,根据体重随机分到10个处理组中,每个处理8个重复,每个重复8只鸡(4只鸡一笼)。
在前人周定勇体外正交试验筛选的最佳酶制剂组合基础上,确定在本试验基础日粮中分别添加5种不同的酶制剂组合,饲喂两种比例的米糠日粮(35%米糠日粮和65%米糠日粮)处理Ⅰ为35%米糠日粮对照组,饲喂35%米糠基础饲粮(不添加任何酶)。
处理Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ在35%基础饲粮中分别添加(植酸酶 木聚糖酶)组合、(木聚糖酶 阿魏酸酯酶 植酸酶)组合、(木聚糖酶 阿魏酸酯酶 植酸酶 纤维素酶)组合、(木聚糖酶 阿魏酸酯酶 植酸酶 纤维素酶 果胶酶)组合。
4. 研究创新点
Adom等【1】发现谷物中最主要的酚酸物质通常是以结合态和游离态存在的,其余部分是以可溶性螯合态存在。
Kaukovirta-Norja等【2】发现谷物籽粒发芽过程中,多酚类物质的含量会有所提高,是因为种子萌发过程中产生的淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶及纤维素酶引发的酶解反应,使得结合态酚类物质释放出来所致。
Alrahmany等【3】发现,使用碳水化合物酶(戊聚糖复合酶、纤维素酶、淀粉酶、淀粉转葡糖苷酶)处理燕麦麸皮能显著提高其中的多酚含量,其分析原因可能是因为燕麦麸皮中多酚物质会与多糖、蛋白质及细胞壁成分以结合态的方式螯合在一起,通过相应酶类的水解作用,可以将结合态的多酚释放出来。
5. 研究计划与进展
2016年10月在师姐的带领下,先进行预实验,熟悉实验过程,对实验中需要特别注意的步骤重点记录,并跟师姐认真学习高效液相色谱仪的使用方法,为后期正式实验做准备;2016年11月,开始正式实验,分别对处理组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ(处理Ⅰ为米糠日粮对照组不添加任何酶的35%或者65%米糠基础饲粮,处理Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ在基础饲粮中分别添加植酸酶 木聚糖酶组合、木聚糖酶 阿魏酸酯酶 植酸酶组合、木聚糖酶 阿魏酸酯酶 植酸酶 纤维素酶组合、木聚糖酶 阿魏酸酯酶 植酸酶 纤维素酶 果胶酶组合),共76个样品进行测样前处理,同时上机测样,并做好相关数据记录。
2017年3月,对实验数据进行分析,并得到相关结论,撰写论文。
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