1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
猪肺炎支原体致病机制猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumoniae, Mhp）是引起猪支原体性肺炎，亦称地方性肺炎(Enzootic Pneumonia，EP)的主要病原体。
长期以来，本病一直被认为是最常发生、流行最广、最难净化、并对养猪业造成重大经济损失的重要疫病之一[1，2]。
猪肺炎支原体感染主要诱导猪呼吸道气管上皮细胞损伤、脱落，研究人员试图从Mhp抗原蛋白角度探究Mhp的致病机理。
2. 研究的基本内容和问题
拟解决的关键问题：阐明FBA在Mhp诱导猪气管上皮细胞损伤中的作用及分子机制阐明FBA诱导猪气管上皮细胞凋亡的胞内通路研究内容① 糖酵解速率对Mhp诱导猪气管上皮细胞凋亡的影响接种Mhp168L株及Mhp168株于猪气管上皮细胞，分别添加不同浓度的葡萄糖和ATP作为激动剂和抑制剂，培养一定时间后进行各指标测定。
② 研究FBA对猪气管上皮细胞凋亡的作用接种醛缩酶于猪气管上皮细胞，分别添加不同浓度的葡萄糖和不同浓度的ATP 作为糖酵解的激动剂和抑制剂，一段时间后测定pH值；进行葡萄糖、丙酮酸、O2- 和H2O2浓度的检测。
③ MhpFBA诱导猪气管上皮细胞凋亡主要途径研究通过对细胞凋亡信号通路包括线粒体通路、死亡受体通路及公共信号通路重要蛋白检测，即BAX、Bcl-2、NF-kB、p38MAPK 及Caspase 等信号通路重要成蛋白分子的表达水平，确定猪肺炎支原体诱导猪气管上皮细胞凋亡的信号通路。
3. 研究的方法与方案
① Mhp168L 株及其亲本强毒株168 株糖酵解差异研究接种Mhp168L 株与Mhp168 株于KM2 培养基中，37℃培养。
分别于培养后0h、2h、6h、12h、18h、24h、30h、36h、42h 和48h 时收集上清，测定PH值，葡萄糖浓度及丙酮酸浓度；收集支原体和上清，进行O2- 和H2O2 浓度测定。
② 糖酵解速率对Mhp 诱导猪气管上皮细胞凋亡的影响接种Mhp168 株于长成单层的猪气管上皮细胞（24孔板），并设立阴性对照组。
4. 研究创新点
创新点：（1）首次从猪肺炎支原体糖酵解角度出发研究猪肺炎支原体诱导猪气管上皮细胞损伤的作用机制本项目拟从猪肺炎支原体糖酵解出发，研究糖酵解在猪肺炎支原体诱导气管上皮细胞损伤的分子机制，将有利于进一步阐明猪肺炎支原体引起机体免疫抑制的机理（2）本研究将阐明猪肺炎支原体糖酵解诱发猪气管上皮细胞损伤的信号途径本项目拟从细胞凋亡信号通路来确定猪肺炎支原体诱导猪气管上皮细胞凋亡的信号通路，而对此目前还未有报道
5. 研究计划与进展
预期目标2016年9月-2016年11月：利用糖酵解激动剂和抑制剂研究在不同糖酵解速率下Mhp168L株和168株诱导猪气管上皮细胞凋亡情况，探讨糖酵解在Mhp致宿主细胞凋亡中的作用及机制。
2016年11月-2017年1月：通过对比FBA单克隆抗体预处理后的FBA、Mhp168L株及Mhp168株诱导猪气管上皮细胞凋亡率的差异，探讨FBA作为膜表面蛋白在Mhp致宿主细胞损伤中的作用。
2017年1月-2017年5月：通过不同处理猪气管上皮细胞凋亡主要调节物的检测探讨FBA致宿主细胞损伤的胞内分子机制。
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